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0自由落体脑外模型给你答案 创伤性脑损伤是指暴力作用于头部造成脑组织器质性损伤。脑外伤幸存者遗留下的短暂或永久的躯体功能障碍、认知障碍以及心理障碍是临床工作中经常遇到的问题。为了更好的研究这些问题的发病机制,脑击打损伤模型是必做的实验之一。 SD大鼠脑击打损伤动物模型 1.剥开软组织,剥离骨外膜,暴露左侧顶骨; 2.在冠状缝后4mm,中线旁左右侧2.5mm处,用高速颅骨钻钻2个小孔,并扩大为直径6mm的骨窗,暴露蛛网膜并保持硬
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0中医药动物模型常见问题解析 1.所选动物与疾病人群体质不符问题 应注重模型动物体质与疾病好发人群的相符性,采用与发病人群相符体质的动物造模。 2疾病与证候关联性不强问题 证候是发病原因的体现,目前模型仍以西医病理病因造模方法主,施加以中医证候体现的干预因素,未能较好地体现疾病和证候之间的因果关联,可以通过大量文献统计,找出该类疾病发生的主要证型,在证候模型基础上施加疾病发生的诱因可能成为该问题解决的主要途
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0在生命科学的发展历程中,模式动物发挥了重要的作用。例如:果蝇模型的建立加速推进了遗传学和发育生物学的发展;利用大鼠、小鼠构建的基因敲除和敲入动物模型,为包括生物化学与生物物理学在内的蛋白质科学相关研究提供了重要工具;构建人类疾病的非人灵长类动物模型为神经科学和心理学等领域发展做出了重要贡献。中医药动物模型指用于中医药相关研究中的动物模型,其广泛应用于中医药的现代化研究,在揭示中医药基础理论、中药作
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0动物造模 高尿酸血症造模为什么不容易成功?高尿酸血症((hyperuricemia, HUA))是由于嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄不足所导致体内尿酸升高的代谢紊乱疾病,随着生活水平的提高和饮食结构的改变、人口老龄化及肥胖的流行,高尿酸血症在世界各地的发病率和患病率均呈逐渐上升趋势。长期 HUA 可诱发多种并发症, 如痛风、Ⅱ型糖尿病、心血管疾病、肝肾功能损伤等。但是模拟和研究人体HUA 并发症的病理诱导过程, 构建长期、稳定的HUA动物模型却不那么容
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0衰老——是每个人从降临到这个世界后就要面对的事情,而“为什么会衰老”、“如何延缓衰老的发生”等问题,可谓是科学界最为深奥、最吸引人的话题。 扪心自问一下,你是否有过那么一瞬间感觉自己“老了”?是突然发现自己一口气爬不上六楼了?或是在熬夜的时候感到心脏在“突突突”直跳? 虽说年龄只是个数字,但不同的生活方式以及健康状态会使得身体呈现出不一样的“年龄”,年近半百的刘畊宏教练曾自爆身体年龄仅有28岁,也有网
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1分子克隆实验——无缝克隆 今天和大家讲讲无缝克隆常见的问题以及解决方法。 1.平板上很少或者没有克隆菌落 建议使用试剂盒附带的阳性对照,可排除试剂盒本身的影响。进一步判定,主要有以下可能的情况和建议: 01载体制备 线性化载体和插入片段的纯度不够,抑制反应。 02插入片段制备 1、引物设计不正确:同源臂15~25nt(不计算酶切位点),CG含量40~60%。 2、线性化载体和插入片段的纯度不够,抑制反应。若线性化载体与插入片段已经过纯化,
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0采用“水上转盘法”建立大鼠全睡眠剥夺模型。本方法一是剥夺动物全部睡眠的方法,根据实验动物怕水的习性设计而成。剥夺装置主要由剥夺箱、转盘及转盘相连接的动力装置三部分组成。箱内盛水,转盘基座与箱底连接,周围注水,转盘高出水面,动物放在转盘上后,匀速转动。由于动物子啊睡眠状态时肌张力降低,离心作用使其掉入水中而惊醒,为避免掉入水中,动物必须不停活动,从而达到剥夺睡眠的目的。 模型制作方法: SD大鼠,体重140-1
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00102120现有实验室超过6000平米,还有3.3万实验室正在在建设中,北京周边实验基地,聚焦基础科研、动物模型、细胞模型、组学服务、生物信息学、基因检测、细胞增殖、细胞周期凋亡、细胞培养、病毒包装 ,稳定株情选、原代细胞分离、流式检测、平板克隆、划痕、侵袭江移、WB、蛋白抽提、蛋白定量、蛋白质纯化、蛋白双向电泳、明胶酶谱、定量PCR、荧光定量PCR服务、包埋切片爬片、免疫组化、免疫荧光等医学科学基础研究与转化医学的研究。08年至今0以1%戊巴比妥钠溶液(50mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠。 将大鼠固定于手术台上,沿中线切开头皮挂线旷置。 手术显微镜下沿眶内缘小心分离左眶软组织,尽量向两眦延伸和视神经眶内段。 依照解剖层次分别牵开眼外肌肉,充分暴露眼球后极纵向切开视神经背侧鞘膜,注意避免伤及视网膜中央动脉。 在眼球后极1.5mm处以显微剪剪断视神经。10嗅球切除(olfactory bulbectomy,OBX)模型是较早建立并应用于抑郁症研究的动物模型,OBX后动物表现出空场活性增加、强迫游泳和悬尾不动时间增加和糖水偏爱下降等行为学特征。 一、实验动物 ♂SD大鼠,体质量100~140g,实验前在安静的环境下适应性饲养2周,自由进食、饮水,自然昼夜节律光照。 二、方法 采用探针捣毁嗅球与负压吸引相结合的方式切除嗅球制作大鼠嗅球切除抑郁症动物模型。 三、模型的建立 大鼠在手术前1周内,每日1~2次抚摸,至0为了确保Western Blot(WB)实验结果的有效性和可重复性,其中很重要的一点就是样本如何上样?通常,小伙伴们面临选择是以相同的蛋白量上样还是以相同的体积上样。每种方法都有其优势和局限性,但以等蛋白量上样通常被认为是更为严谨和科学的方法。这是因为蛋白质表达水平的变化对实验结果的解释至关重要,而等蛋白量上样可以较直接地反映这些变化。 等蛋白量上样可以比较不同样本中目标蛋白的相对含量,从而更准确地评估生物学变化或处0动物造模:大小手术模型 药物诱导模型 模型评价监测:行为学检测 影像检测 生化生理指标检测 细胞培养 细胞爬片 细胞转染 流式细胞术 慢病毒包装 细胞划痕 细胞迁移 细胞侵袭 稳定株筛选等 硬组织切片 包埋 切片 染色 特殊染色 免疫组化 免疫荧光 荧光定量PCR服务 miRNA检测 DNA定量 甲基化测序 质粒提取 质粒构造 菌种鉴定 慧星实验 引物合成等 蛋白质纯化 蛋白质电泳 单克隆抗体制备 原核表达 免疫沉淀 免疫共沉淀 SILAC标记定量蛋白质组学 ELISA检00000动物造模:大小手术模型 药物诱导模型 模型评价监测:行为学检测 影像检测 生化生理指标检测 细胞培养 细胞爬片 细胞转染 流式细胞术 慢病毒包装 细胞划痕 细胞迁移 细胞侵袭 稳定株筛选等 硬组织切片 包埋 切片 染色 特殊染色 免疫组化 免疫荧光 荧光定量PCR服务 miRNA检测 DNA定量 甲基化测序 质粒提取 质粒构造 菌种鉴定 慧星实验 引物合成等 蛋白质纯化 蛋白质电泳 单克隆抗体制备 原核表达 免疫沉淀 免疫共沉淀 SILAC标记定量蛋白质组学 ELISA检00养细胞这件事儿,看似简单,然而却常常因为各种原因,让我们珍贵的实验细胞一再受损或者die。 本期博主就结合多年实践经验和细胞培养指南, 为大家讲述细胞从复苏、传代到冻存等一系列过程及常遇到的那些你可能忽略的小却重要的细节。 1⃣细胞的营养来源 2⃣细胞的居住环境 3⃣细胞的复苏与冻存 4⃣细胞的传代培养 以及常见问题解答 满满的干货与tips ,欢迎大家👍收藏,一起讨论交流呀00定量PCR(qPCR)是一种在PCR反应中实时监测核酸扩增产物的方法。为什么qPCR提RNA不提DNA?RNA更能反映gene的表达水平 依据中心法则,细胞内的DNA序列首先被转录成RNA分子,特别是信使RNA(mRNA),随后mRNA携带遗传信息,用于指导蛋白质的合成。mRNA的丰度和多样性是衡量基因表达水平的关键指标,它们直接关联到特定基因在特定时间和条件下的活性。与蛋白质相比,RNA的水平变化能够更快地反映基因表达的动态变化,因为RNA的稳定性相对较低,其水平变1※什么是实验外包? 实验外包即将实验外包于独立科研机构之外的第三方实验室,已经成为发展趋势。 第三方实验室不仅实验设备先进,可操作实验的规模和种类也是多种多样,国家层面也出台政策推动科研单位与企业利用资源优势互补,提高科研效率。 ※为什么选择实验外包? 一,节省时间 实验周期长,耗费时间多,将实验外包可以节省大量时间。 二,节约费用 实验仪器繁多,价格昂贵,将实验外包可以节省实验设备采购,将有限的科研费用用00实验外包现在是越来越多人的选择了,大家也都从好奇,质疑走到了理解接受,这也是实验外包这个行业越来越被认可的原因,现在国家也鼓励资源最大化利用,高效科研,这也是这个行业壮大的原因之一 有人反馈说,现在是想要实验外包,但是不知道怎么找,不知道哪些比较靠谱,在此我想说的是——现在这个行业进入了发展的快车道,很多人都开始进入到这个行业,其中不乏毕业的博士生,实验器械公司,甚至还有刚毕业的大学生硕士生直接开10实验外包000SD大鼠,8周龄,雄性。实验室温度18-25°C,常规饲养,自由饮食。 运动方式与条件:无负重游泳,玻璃缸游泳池,水深约为大鼠体长的两倍,水温为30-32°C。 心理应激模型的制备:采用大鼠旁观电击模型,电击组的大鼠(电流1-2mA,周期100s,间歇90s)被电击惊叫、惊跳;心理应激模型组大鼠不受电击,只是旁观电击组大鼠受电击的过程,通过视觉、听觉等产生心理应激应激于实验末日分批进行,持续30min。 分组域实验控制包括:a、对照组:不运动,00QPCR 干粉引物溶解稀释的一般方法如下: 收到引物后,在开启离心管盖前,在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟,以防开盖时引物干粉散失。因为引物在干燥过程中,寡核苷酸在EP管底部形成白色片状沉淀。鉴于运输过程中沉淀会飘起,在打开管盖之前进行简短离心这一步骤至关重要。 引物保存在高浓度的状况下比较稳定。如果对实验的重复性要求较高,合成的 OD 数较大,建议分装,避免反复冻融。 引物一般配制成10-100umol/l。 引物的浓度可以通过以1载体 在Cohen和Boyer的实验中,两种质粒都能在E. coli中复制。因此,这两种质粒都可以作为载体,使重组DNA得以复制。所有基因克隆实验都需要这样的载体,我们称之为载体(Vector),但典型的基因克隆实验只涉及一个载体,以及一个依赖于载体进行复制的外源DNA片段。外源DNA没有复制起点,即DNA复制开始的地方,因此除非将其放入具有复制起点的载体中,否则它无法复制。自20世纪70年代中期以来,已经开发了许多载体;这些载体分为两大类:质粒(pl000在所有RNA实验中,最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定,一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解,而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果,所以RNA的制备与分析操作难度极大。 在实验中,一方面要严格控制外源性RNA酶的污染;另一方面要最大限度地抑制内源性的RNA酶。RNA酶可耐受多种处理而不0载体 在Cohen和Boyer的实验中,两种质粒都能在E. coli中复制。因此,这两种质粒都可以作为载体,使重组DNA得以复制。所有基因克隆实验都需要这样的载体,我们称之为载体(Vector),但典型的基因克隆实验只涉及一个载体,以及一个依赖于载体进行复制的外源DNA片段。外源DNA没有复制起点,即DNA复制开始的地方,因此除非将其放入具有复制起点的载体中,否则它无法复制。自20世纪70年代中期以来,已经开发了许多载体;这些载体分为两大类:质粒(pl